Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka ad 5

Frakcję przepływową analizowano pod względem wyczerpania M-kolca za pomocą SPEP. Dolne panele pokazują densytometryczną kwantyfikację pasm wykonanych za pomocą oprogramowania ImageJ. Wykres słupkowy w panelu F pokazuje procentową redukcję przeciwciał anty-LGL1 w próbkach surowicy uzyskanych od myszy z GBA1 – / – po leczeniu eligulatem (dieta testowa), w porównaniu z myszami, które otrzymały dietę kontrolną. Dane to środki; T bary oznaczają błędy standardowe. Wykres słupkowy w panelu G pokazuje procentowe zmniejszenie intensywności M-spike w próbkach surowicy otrzymanych od myszy GBA1 – / – po traktowaniu dietą testową, w porównaniu z myszami, które otrzymały dietę kontrolną. Dane to środki; T bary oznaczają błędy standardowe. Rozregulowanie bioaktywnych lipidów i limfocytów T reagujących na lipidy obserwowano również u pacjentów ze sporadycznym szpiczakiem.16,20 W związku z tym przeanalizowaliśmy, czy immunoglobulina klonalna w sporadycznym MGUS i szpiczaku jest również reaktywna względem lipidów. Skoki M u 33% badanych pacjentów (22 z 66 pacjentów) były reakcjami reaktywnymi względem LGL1 (Tabela i Figura 2A). Reaktywne wobec LGL1 immunoglobuliny klonalne reagowały krzyżowo z LPC (Figura 2B). W przeciwieństwie do tego nie zaobserwowano reaktywności u pacjentów z gammapatią poliklonalną, która nie była związana z chorobą Gauchera (tabela i fig. S3 w dodatkowym dodatku).
Oczyszczone immunoglobuliny klonalne reaktywne względem LGL1 i LPC nie reagowały przeciwko kardiolipinie, lipidowi A lub DAG w immunoblotach specyficznych dla antygenu (Figura 2C) lub w teście ELISA o podobnych poziomach oczyszczonej immunoglobuliny (Fig. Reaktywność lipidową klonalnych immunoglobulin zweryfikowano za pomocą kilku podejść. Analiza izotypów łańcucha lekkiego kappa i lambda przeciwciał anty-LGL1 ujawniła silny skośny łańcuch lekki w kierunku zaangażowanego klonalnego łańcucha lekkiego tylko u pacjentów z skoczkami M reagującymi na lipidy (Fig. S5 w dodatkowym dodatku).
Immunoglobuliny reaktywne względem LGL1 wykazywały taką samą swoistość łańcucha ciężkiego i lekkiego jak klonalna immunoglobulina w immunoblottingu (ryc. S6 w dodatku uzupełniającym). Inkubacja próbek surowicy za pomocą perełek pokrytych sfingozyną doprowadziła do swoistego wzbogacenia immunoglobuliny klonów we frakcję wiążącą perełkę u pacjentów z pikami M reagującymi na lipidy, ale nie wtedy, gdy immunoglobulina klonalna nie była reaktywna wobec lipidów (figura 2D). Podobnie, analiza frakcji przepływu kulek wykazała specyficzne zubożenie M szczytów tylko u pacjentów z M kolcami reagującymi na lipidy (Figura 2E).
Fragmenty F (ab ) 2, które zostały wyizolowane z immunoglobulin klonów, zachowały zdolność rozpoznawania antygenu, która była podobna do tej dla nienaruszonej immunoglobuliny w teście ELISA i mogła zostać wzbogacona perełkami sprzężonymi z ligandem (ryc. S7 w dodatkowym dodatku), które wskazał, że wiązanie tych klonalnych immunoglobulin z ligandami odbywa się za pośrednictwem F (ab) 2. Powinowactwo wiązania reaktywnych względem LGL1 immunoglobulin klonalnych do antygenu oszacowano na około 57 x 10-9 M, co jest porównywalne z obserwowanym dla innych przeciwciał (ryc. S8 w dodatku uzupełniającym).
Kohorta pacjentów z gammopatiami reagującymi na lipidy miała wyższy odsetek kappa łańcucha lekkiego, stadium I szpiczaka i mniejszy udział czynników cytogenetycznych pośrednich lub wysokiego ryzyka niż u pacjentów, którzy nie mieli immunoglobulin klonalno-reaktywnych w lipidach (Tabela S1 w dodatkowym dodatku)
[podobne: stomatologia katowice, anatomia palpacyjna, stomatolog płock ]

Powiązane tematy z artykułem: anatomia palpacyjna stomatolog płock stomatologia katowice