Ponowna reakcja na kryzotynib za pomocą Lorlatinibu ALK Resistance Mutation L1198F

U pacjentki z przerzutowym rakiem płuca z przerzutami do kinazy anaplastycznej (ALK) oporność na kryzotynib rozwinęła się z powodu mutacji w domenie kinazy ALK. Przewiduje się, że ta mutacja spowoduje substytucję cysteiny przez tyrozynę przy reszcie aminokwasowej 1156 (C1156Y). Jej guz nie reagował na inhibitor ALK drugiej generacji, ale reagował na lorlatinib (PF-06463922), inhibitor trzeciej generacji. Po nawrocie jej guza, sekwencjonowanie opornego guza ujawniło mutację ALK L1198F oprócz mutacji C1156Y. Substytucja L1198F nadaje oporność na lorlatynib poprzez steryczną interferencję z wiązaniem leku. Jednak L1198F paradoksalnie wzmaga wiązanie z kryzotynibem, negując działanie C1156Y i ponownie rozróżniając oporne raki na kryzotynib. Pacjentka ponownie otrzymała kryzotynib, a jej objawy związane z rakiem i niewydolność wątroby ustąpiły. Continue reading “Ponowna reakcja na kryzotynib za pomocą Lorlatinibu ALK Resistance Mutation L1198F”

Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka ad 6

Dane te pokazują, że klonalna immunoglobulina reaguje z bioaktywnym lizolitem u prawie jednej trzeciej pacjentów ze sporadycznym MGUS lub szpiczakiem, a kohorty pacjentów z gammopatiami reagującymi na lipidy mogą mieć wyraźny profil kliniczny. Dyskusja
Zrozumienie antygenowej reaktywności klonalnej immunoglobuliny nie tylko ma bezpośredni wpływ na antygenowe pochodzenie szpiczaka, ale może również prowadzić do nowych strategii zapobiegania lub leczenia klinicznego raka poprzez celowanie w leżący u jego podstaw antygen. Długotrwała stymulacja antygenowa może w zasadzie również sprzyjać niestabilności genomu w szpiczaku poprzez angażowanie deaminaz cytydyny. [21] W gammopatii związanej z chorobą Gauchera redukcję LGL1 można osiągnąć za pomocą terapii zmniejszających stężenie substratu.22 Karmienie eliglustatem do GBA1 – / – myszy z klonalnymi immunoglobulinami doprowadziły do zmniejszenia liczby przeciwciał anty-LGL1 (Figura 2F), jak również do zmniejszenia immunoglobuliny klonów in vivo (Figura 2G), co wskazuje, że gammopatia związana z chorobą Gauchera może być ukierunkowana przez zmniejszenie antygen. Dane te są również zgodne z ostatnimi ustaleniami dotyczącymi zmniejszonego ryzyka raka komórek B z redukcją substratu w innym modelu choroby Gauchera.23
Rozregulowanie lizoli- pidów opisano także w kontekście otyłości24. Wykazano, że ryzyko szpiczaka jest wyższe u osób otyłych niż u osób o prawidłowej masie ciała 1, a otyłość wywołana dietą promuje szpiczaka stan u myszy.25 Konieczne są dalsze badania w większych kohortach, aby potwierdzić korelacje kliniczne i lepiej zdefiniować genetykę szpiczaka reagującego na lipidy. Konieczne są badania kliniczne, aby ocenić, czy zmiana poziomów bioaktywnych lipidów może wpływać na historię naturalną gammopatii ze swoistością dla takich lipidów. Continue reading “Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka ad 6”

Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka ad 5

Frakcję przepływową analizowano pod względem wyczerpania M-kolca za pomocą SPEP. Dolne panele pokazują densytometryczną kwantyfikację pasm wykonanych za pomocą oprogramowania ImageJ. Wykres słupkowy w panelu F pokazuje procentową redukcję przeciwciał anty-LGL1 w próbkach surowicy uzyskanych od myszy z GBA1 – / – po leczeniu eligulatem (dieta testowa), w porównaniu z myszami, które otrzymały dietę kontrolną. Dane to środki; T bary oznaczają błędy standardowe. Wykres słupkowy w panelu G pokazuje procentowe zmniejszenie intensywności M-spike w próbkach surowicy otrzymanych od myszy GBA1 – / – po traktowaniu dietą testową, w porównaniu z myszami, które otrzymały dietę kontrolną. Dane to środki; T bary oznaczają błędy standardowe. Rozregulowanie bioaktywnych lipidów i limfocytów T reagujących na lipidy obserwowano również u pacjentów ze sporadycznym szpiczakiem.16,20 W związku z tym przeanalizowaliśmy, czy immunoglobulina klonalna w sporadycznym MGUS i szpiczaku jest również reaktywna względem lipidów. Continue reading “Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka ad 5”

Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka czesc 4

Klonalna immunoglobulina u 17 z 20 pacjentów z chorobą Gauchera i u 6 z 6 myszy GBA1 – / – (które wiernie rekapitulują chorobę Gauchera typu u ludzi) 17 z gammapatią monoklonalną była specyficzna dla LGL1. Reaktywność LGL1 obserwowano również w przypadku poliklonalnej gammopatii związanej z chorobą Gauchera (Figura 1A). Przeciwnie, wykrywano jedynie niską lub reaktywność tła w próbkach pobranych od zdrowych dawców lub myszy kontrolnych. Aby pokazać zdolność LGL1 do pośredniczenia w aktywacji komórek B i komórek plazmatycznych w chorobie Gauchera in vivo, hiperimmunizowaliśmy młode myszy GBA1 – / – LGL1. Te myszy mają już nieco wyższy poziom komórek B Fas + GL7 + zarodka na linii podstawowej niż poziom u myszy kontrolnych (Figura 1C). Jednakże wstrzyknięcie LGL1 doprowadziło do dalszego wzrostu komórek B zarodka Fas + GL7 + zarodka (Figura 1C), jak również do wzrostu komórek plazmatycznych CD38 + CD138 + szpiku kostnego (Figura 1D i Fig. S1 w Dodatkowym Dodatku , dostępne z pełnym tekstem tego artykułu na). Continue reading “Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka czesc 4”

Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka cd

Siedem myszy z chorobą Gauchera otrzymywało dietę testową codziennie w dawce 150 mg na kilogram masy ciała, a siedem myszy z chorobą Gauchera, które pasowały do wieku i płci, otrzymywało dietę podstawową (dieta kontrolna). Zwierzęta otrzymywały przypisane diety przez 2 miesiące, a następnie zostały poddane eutanazji w celu pobrania tkanki i krwi. Analiza statystyczna
Kohorty pacjentów z chorobą Gauchera i sporadyczną gammapatią monoklonalną (MGUS lub szpiczak) i zdrowych dawców porównano z użyciem statystyk nieparametrycznych i obliczono wartości P. Dwustronne wartości P na poziomie alfa 0,05 uważano za wskazujące na istotność statystyczną. Dokładne testy Fishera i testy U Manna-Whitneya przeprowadzono przy użyciu oprogramowania Stata (StataCorp).
Wyniki
Klonalna immunoglobulina w chorobie Gauchera
Figura 1. Figura 1. Continue reading “Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka cd”

Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka ad

Żele do elektroforezy białek w surowicy nanoszono na błonę lipidową za pomocą zmodyfikowanej dyfuzji. Po zablokowaniu 1% BSA w detergencie PBS i Tween 20 membranę inkubowano z odpowiednim przeciwciałem wtórnym sprzężonym z peroksydazą chrzanową (HRP) i przemywano i opracowane przy użyciu chemiluminescencyjnego podłoża SuperSignal West Pico (Thermo Scientific). Test immunoenzymatyczny
Rozcieńczone ludzkie osocze (rozcieńczenie 1: 250) dodano do płytek pokrytych LGL1 (500 ng na studzienkę), a poziomy łańcuchów lekkich immunoglobuliny kappa i lambda określono za pomocą ludzkiego kappa- i lambda specyficznego enzymatycznego immunosorbentu. zestawy do oznaczania ilościowego w teście (ELISA) (Bethyl Laboratories) .15 Do pomiaru przeciwciał specyficznych względem lizozymu (HEL) i przeciwciał lipidowych (LGL1, DAG, kardiolipina i lipid A), płytki (płytka Nunc-Immuno, Thermo Scientific) były powlekane równomolowym stężeniem antygenów przez noc w temperaturze pokojowej, a następnie blokowane 1% BSA w PBS i Tween 20 detergentem przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Badaną surowicę i oczyszczoną próbkę immunoglobuliny rozcieńczono w 1% BSA w PBS i Tween 20 detergencie i inkubowano przez noc w 4 ° C. Przeciwciało swoiste dla antygenu wykrywano przez skoniugowane z HRP mysie i ludzkie immunoglobuliny, które opracowano z chromogenem TMB (3,3 , 5,5 -tetrametylobenzydyna, Invitrogen).
Ligand-Mediated Enrichment and Depletion of Clonal Immunoglobulin
Rozcieńczone ludzkie osocze (rozcieńczenie 1: 250) inkubowano z 50 mm3 perełek kontrolnych lub pokrytych sfingozyną (Echelon Biosciences). Continue reading “Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka ad”

Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka

Selekcja kierowana przez antygen jest zaangażowana w patogenezę monoklonalnych gammopatii. Pacjenci z chorobą Gauchera mają zwiększone ryzyko wystąpienia gammopatii monoklonalnych. Tutaj pokazujemy, że klonalna immunoglobulina u pacjentów z chorobą Gauchera i modelami mysimi gammopatii związanej z chorobą Gauchera jest reaktywna wobec lizo-glukozyloceramidu (LGL1), który jest znacząco podwyższony u tych pacjentów i myszy. Klonalna immunoglobulina w 33% sporadycznych ludzkich gammopatii monoklonalnych jest również specyficzna dla lizoli lipidów LGL1 i lizofosfatydylocholiny (LPC). Redukcja substratu łagodzi gammapatię związaną z chorobą Gauchera u myszy. Zatem długotrwała aktywacja immunologiczna przez lizoli- pidy może leżeć u podstaw zarówno gammopatii związanych z chorobą Gauchera, jak i niektórych sporadycznych gammopatii monoklonalnych.
Wprowadzenie
Szpiczak mnogi i gammapatia monoklonalna o nieokreślonym znaczeniu (MGUS) charakteryzują się klonalną ekspansją transformowanych komórek plazmatycznych.1 Analizy genów immunoglobulin w komórkach nowotworowych dostarczyły dowodów na selekcję opartą na antygenach, z ograniczonym zastosowaniem regionu zmiennego łańcucha ciężkiego i wysoce hipermutowaną geny łańcucha ciężkiego i lekkiego immunoglobuliny.2-6 Jednak antygeny leżące u podstaw początków większości MGUS i klonów szpiczaka pozostają nieznane. Continue reading “Klonowa immunoglobulina przeciwko lizoli-pidom w genomie szpiczaka”

Laminektomia plus fuzja a laminektomia sama w przypadku spondylolistycznego odcinka lędźwiowego ad 8

Obecnie niektórzy chirurdzy stosują techniki minimalnie inwazyjne i używają przedłużaczy kości lub morfogenetycznych białek kości zamiast przeszczepów kostnych zebranych z grzebienia kości biodrowej. Ponadto, zastosowanie technik fuzji międzylaboratoryjnej zwiększyło się od czasu zakończenia próby SLIP.26 W badaniu spondylolistycznym SPORT nie zidentyfikowano żadnej techniki fuzji jako wyższej od pozostałych27; autografty z grzebienia biodrowego były stosowane w prawie jednej trzeciej przypadków i nie było znaczących różnic w częstości stapiania kości ani w szybkości reoperacji.28 Najbardziej skuteczna metoda tworzenia fuzji lędźwiowej nie jest znana. Występowały marginalne, nieistotne różnice w wyjściowych zmiennych między pacjentami w grupie z samą dekompresją a grupą z fuzją. Niektóre różnice w obserwowanych wynikach można przypisać różnicom wyjściowym, a nie randomizowanemu. Dodatkowe badania są ważne dla potwierdzenia obserwacji poczynionych w procesie SLIP, które mogą nie dać się uogólnić.
Wykazano, że podsumowanie składowych fizycznych SF-36 jest prawidłowym, czułym i niezawodnym narzędziem do oceny degeneracyjnych stanów kręgosłupa lędźwiowego17. Założenie, które przyjęliśmy przy obliczaniu wstępnego oszacowania wielkości próbki, że 10% losowo przypisanych pacjenci byliby narażeni na dalszą obserwację, byli w miarę dokładni po roku (11%) i po 2 latach (14%); jednak, przez 4 lata, 30% pacjentów w początkowych randomizowanych grupach terapeutycznych zostało utraconych do obserwacji. Continue reading “Laminektomia plus fuzja a laminektomia sama w przypadku spondylolistycznego odcinka lędźwiowego ad 8”

Laminektomia plus fuzja a laminektomia sama w przypadku spondylolistycznego odcinka lędźwiowego ad 7

Pierwszorzędową miarą wyniku była zmiana w jakości życia związanej ze zdrowiem fizycznym po 2 latach, mierzona za pomocą sumarycznego wyniku podsumowania fizycznego składnika SF-36. Chociaż wyniki nie różniły się istotnie między grupami leczonymi po roku od operacji, dodanie fuzji lędźwiowej do laminektomii wiązało się ze znacznie większym wzrostem wyniku sumarycznego fizycznego komponentu SF-36 po 2, 3 i 4 latach po operacji , co sugeruje utrzymującą się różnicę między terapiami w czasie. Różnice między grupami w podnoszeniu wyniku sumarycznego składnika fizycznego SF-36 były niewielkie, ale klinicznie znaczące. Nie zaobserwowaliśmy znaczących różnic między grupami w odniesieniu do zmniejszenia wyniku ODI, który był drugorzędną miarą niepełnosprawności związanej z bólem pleców. Ogólnie przyjmuje się, że mobilna kręgozmyk zwyrodnieniowy z mechanicznym bólem krzyża powoduje niestabilność w odcinku lędźwiowym kręgosłupa i powinna być leczona za pomocą dekompresji plus fuzja.22. W badaniu SLIP rozważano, czy laminektomia lędźwiowa destabilizuje kręgosłup lędźwiowy w kontekście niemobilna zwyrodnieniowa kręgozmyk. W badaniu SLIP zwyrodnienie kręgosłupa po laminektomii lędźwiowej było wystarczająco niestabilne, aby wymagać reoperacji u co najmniej jednej trzeciej pacjentów. Continue reading “Laminektomia plus fuzja a laminektomia sama w przypadku spondylolistycznego odcinka lędźwiowego ad 7”

Laminektomia plus fuzja a laminektomia sama w przypadku spondylolistycznego odcinka lędźwiowego ad 6

Występowała znacząca różnica między grupami w średnim wyniku leczenia (tj. Zmiana wyniku sumarycznego komponentu SF-36 od wartości wyjściowej) o 5,7 punktu (95% CI, 0,1 do 11,3, P = 0,046). Wielkość różnicy w efekcie leczenia utrzymywała się wzdłuż w ciągu 4 lat po operacji (różnica w 4 latach, 6,7 punktu, 95% CI, 1,2 do 12,3, P = 0,02) (Tabela 2 i Figura 2). Wśród pacjentów, którzy byli dostępni w 2-letniej obserwacji, 24 z 28 w grupie fuzji i 20 z 29 w grupie z samą dekompresją mieli wcześniej określoną klinicznie istotną różnicę 5 punktów w fizycznym komponencie SF-36. wynik sumaryczny. Zgodnie z modelem regresji logistycznej z przypadkowym punktem przecięcia, przewidywany współczynnik minimalnej klinicznie istotnej różnicy wynoszący 5 punktów w 2-letniej obserwacji wynosił 91,9% (95% CI, 73,1 do 97,9) wśród pacjentów w grupie 76,1% (95% CI, 49,7 do 91,1) wśród pacjentów w grupie z samą dekompresją (różnica, 15,8 punktu procentowego, 95% CI, -16,0 do 47,6; P = 0,18).
Nie nakreślono wcześniej określonego planu dostosowania różnic bazowych między grupami. Continue reading “Laminektomia plus fuzja a laminektomia sama w przypadku spondylolistycznego odcinka lędźwiowego ad 6”