Wrodzone Odporności i Ryzyko Astmy u Aryszów i Hutników cd

Dane z cytometrii przepływowej uzyskano za pomocą analizatora komórek LSRFortessa (BD Biosciences), a dane dotyczące pozyskiwania analizowano za pomocą oprogramowania FlowJo (Tree Star). Zbieranie pyłu i przygotowanie ekstraktu
Odpylacze elektrostatyczne umieszczono w jednej sypialni i salonie w 10 domach Amish i 10 Hutterite w celu zebrania pyłu w powietrzu. We wszystkich 10 domach Amiszów i 9 z 10 domów Huterytów mieszkały dzieci, które brały udział w badaniu. Po miesiącu analizowano pył pod względem poziomu endotoksyny i alergenu, a ekstrakty przygotowywano do badań na myszach. Ponadto zastosowano próżnię do zbierania kurzu z podłogi w pomieszczeniach mieszkalnych w domach Amiszów oraz z materacy w domach Amiszów i Huterytów do użytku w badaniach mikrobiomów (zgodnie z opisem w sekcji Metody w dodatkowym dodatku). Wodne ekstrakty z domowego pyłu z domów Amish i Hutterite zostały przygotowane zgodnie z opisem w sekcji Metody w Dodatkowym dodatku.
Badania genetyczne
RNA wyekstrahowano z rozmrożonych komórek przy użyciu Mini Kit DNA / RNA AllPrep (Qiagen). RNA poddano komplementarnej syntezie DNA, a następnie hybrydyzowano z macierzami HumanHT-12 v4 Expression BeadChip (Illumina). Wspólny zestaw składający się z 118 779 polimorfizmów pojedynczych nukleotydów (SNP) został genotypowany lub przypisany 60 dzieciom w badaniu (patrz Rys.
Modele myszy
Poddaliśmy donosowo 50 .l wyciągu z kurzu domowego co 2 do 3 dni (łącznie 14 razy) 7-tygodniowym myszom BALB / c (Harlan Laboratories), począwszy od dnia 0. Myszy uczulono dootrzewnowo 20 razy. .g albuminy jaja kurzego (klasa V, Sigma) z ałunem (Pierce) w dniach 0 i 14 i zostały poddane donosowo prowokacji 50 .g albuminy jaja kurzego w dniach 28 i 38. Począwszy od 5 dni przed dniem 0, również zaszczepiliśmy 50 .l ekstraktu kurzu z Amish podaje donosowo co 2 do 3 dni (w sumie 14 razy) u 7-tygodniowych myszy C57BL6 typu dzikiego, myszy z niedoborem MyD8812 oraz u myszy z niedoborem MyD88 i Trif13 (Jackson Laboratories). Myszy te uczulano dootrzewnowo 20 .g albuminy jaja kurzego i ałunu w dniach 0 i 14 i prowokowano donosowo 75 .g owsianu jaja w dniach 26, 27 i 28.
Analiza statystyczna
Analizy statystyczne przeprowadzono przy użyciu oprogramowania R lub Prism (GraphPad). Różnice w rozkładach średnich poziomów cytokin między dziećmi amiszów i hutytów zostały określone za pomocą testu rang podpisanych Wilcoxona. Wykorzystaliśmy regresję liniową do identyfikacji genów ulegających ekspresji różnicowej w próbkach niepoddanych obróbce Amiszów i Huterytów leukocytów krwi obwodowej. Metody Benjaminiego i Hochberg14 zostały użyte do kontrolowania współczynnika fałszywego wykrywania. W badaniach cytometrii przepływowej i badaniu na myszach różnice w populacjach komórek i oporności dróg oddechowych oceniano za pomocą niesparowanego testu t Studenta. Dodatkowe szczegóły dotyczące przetwarzania próbek, kontroli jakości i analizy statystycznej dla wszystkich metod opisanych tutaj znajdują się w sekcji Metody w dodatkowym dodatku.
Wyniki
Astma i uczuleniowe wskaźniki uczulenia i genetyczne pochodzenie
Żadne z dzieci Amiszów i szóstka (20%) dzieci huteyckich nie chorowało na astmę, podobnie jak w przypadku wcześniejszych badań.10,11 poziomów całkowitej IgE w surowicy i liczba dzieci, u których poziom IgE w stosunku do typowych alergenów był wysoki ( zdefiniowane jako ponad 3,5 kUA [jednostka specyficzna dla alergenu] na litr) były niższe w grupie Amiszów niż w grupie Huterytów (tabela oraz tabela S2 w dodatkowym dodatku)
[przypisy: chirurgiczne usuwanie ósemek, Stomatolog Kraków, stomatolog zielona góra ]

Wrodzone Odporności i Ryzyko Astmy u Aryszów i Hutników cd

Dane z cytometrii przepływowej uzyskano za pomocą analizatora komórek LSRFortessa (BD Biosciences), a dane dotyczące pozyskiwania analizowano za pomocą oprogramowania FlowJo (Tree Star). Zbieranie pyłu i przygotowanie ekstraktu
Odpylacze elektrostatyczne umieszczono w jednej sypialni i salonie w 10 domach Amish i 10 Hutterite w celu zebrania pyłu w powietrzu. We wszystkich 10 domach Amiszów i 9 z 10 domów Huterytów mieszkały dzieci, które brały udział w badaniu. Po miesiącu analizowano pył pod względem poziomu endotoksyny i alergenu, a ekstrakty przygotowywano do badań na myszach. Ponadto zastosowano próżnię do zbierania kurzu z podłogi w pomieszczeniach mieszkalnych w domach Amiszów oraz z materacy w domach Amiszów i Huterytów do użytku w badaniach mikrobiomów (zgodnie z opisem w sekcji Metody w dodatkowym dodatku). Wodne ekstrakty z domowego pyłu z domów Amish i Hutterite zostały przygotowane zgodnie z opisem w sekcji Metody w Dodatkowym dodatku.
Badania genetyczne
RNA wyekstrahowano z rozmrożonych komórek przy użyciu Mini Kit DNA / RNA AllPrep (Qiagen). Continue reading “Wrodzone Odporności i Ryzyko Astmy u Aryszów i Hutników cd”

Powiązane tematy z artykułem: gabinet stomatologiczny Warszawa stomatolog dziecięcy stomatologia katowice